Vision色譜柱填充方法一般有4種:
①高壓勻漿法,多用于分析柱和小規模制備柱的填充;
②徑向加壓法,Vision色譜柱;
③軸向加壓法,主要用于裝填大直徑柱;
④干法。柱填充的技術性很強,大多數實驗室使用已填充好的商品柱。
必須指出,液相色譜柱的獲得,裝填技術是重要環節,但根本問題還在于填料本身性能的優劣,以及配套的色譜儀系統的的結構是否合理。
無論是自己裝填的還是購買的Vision色譜柱,使用前都要對其性能進行考察,使用期間或放置一段時間后也要重新檢查。柱性能指標包括在一定實驗條件下(樣品、流動相、流速、溫度)下的柱壓、理論塔板高度和塔板數、對稱因子、容量因子和選擇性因子的重復性,或分離度。一般說來容量因子和選擇性因子的重復性在±5%或±10%以內。進行柱效比較時,還要注意柱外效應是否有變化。
一份合格的Vision色譜柱評價報告應給出柱的基本參數,如柱長、內徑、填料的種類、粒度、色譜柱的柱效、不對稱度和柱壓降等。
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